Com a finalidade de avaliar a antibiose in vitro de actinomicetos oriundos de plantas do Cerrado no crescimento micelial de Fusarium oxysporum f. sp. cubense, foi realizado um ensaio experimental no laboratório de Fitopatologia da Universidade do Estado da Bahia – Campus IX, de Maio a Julho de 2017. No antagonismo in vitro, foi empregado o método de cultura pareada em placas de Petri. Foram usados sete isolados de actinomicetos da coleção do laboratório supracitado, denominados Ac.I, Ac.II, Ac.III, Ac.IV, Ac.V, Ac.VI e Ac.VII, sendo em delineamento inteiramente casualizado com 5 repetições, cada parcela foi constituída por duas placas. Após a obtenção dos dados do crescimento micelial, foi calculada a percentagem de inibição (% I) do F. oxysporum dos tratamentos em relação à testemunha. Todos os isolados de actinomicetos usados no pareamento in vitro inibiram o crescimento do fungo Fusarium oxysporum f. sp. cubense. Os valores de taxa de inibição pelos actinomicetos usados apresentaram variação de 44% e 60%. Os actinomicetos testados mostraram-se promissores como agentes de biocontrole no Mal-do-Panamá.